Eldex 水解/衍生化工作站操作指南（液相和氣相水解）

本節簡要概述了工作站的設置和操作。有關更多信息，請參閱 Eldex 工作站手冊。

4.2 物理要求

該設備需要連接真空和氮氣。

工作站配備了一個杜瓦瓶和冷指示器。杜瓦瓶需要干冰。

設備的反應瓶組件可以同時容納多達 12 個樣品管。

4.3 試劑要求

• 6 N HCl（體積中含 1% 酚）
• 氮氣（預純化級）
• 甲醇
• 干冰

4.4 樣品準備

用酸（如 6 N HCl）清洗樣品管。用水徹底沖洗，然后用 100%（未變性）乙醇沖洗。將其在真空下干燥。為了便于識別，樣品管在放入反應瓶之前可以用鉆石鉛筆刻字。

使用注射器或微量移液管將含有 0.5–10 μg 樣品的溶液置入樣品管中。一個反應瓶中可以放置多達 12 根樣品管。樣品管應使用特氟龍鑷子或塑料手套處理，以防止皮膚接觸造成污染。

為了讓烘箱達到平衡，在進行水解之前，將其設置為 105 °C，預熱 20–30 分鐘。

4.5 溶液蒸發至干

在冷指示器周圍的杜瓦瓶中放入干冰。小心地將甲醇或 2-丙醇加入冷阱中。

開啟真空泵。

將反應瓶的瓶蓋擰緊。將瓶蓋上的按鈕滑動到開放（綠色在內）位置。

將反應瓶安裝到工作站上，將瓶子的頂部對準真空口，并將瓶子的底部滑入工作站上的黑色“鞋子”中。

打開真空閥門。

當真空計讀數達到約 65 毫托時，樣品已正確蒸發。

為了進一步干燥，讓系統保持在此讀數幾分鐘。

關閉真空閥門，取下反應瓶。擰開瓶蓋。

在瓶底添加 200 μL 的 HCl/酚混合液。注意不要讓 HCl 直接進入任何管中。

將反應瓶蓋保持在開放（綠色在內）位置，擰緊瓶蓋，并將瓶子安裝到工作站上。

4.6 真空-氮氣循環

確認氮氣閥門關閉，小心地打開真空閥門，直到真空計讀數達到約 1–2 Torr，并且 HCl 開始冒泡。此過程大約需要 20–30 秒。

關閉真空閥門。

打開氮氣閥門，通氮氣五秒鐘。然后關閉氮氣閥門。

重復真空-氮氣循環三次。在最后一次循環后保持真空閥門開啟。

不要將酸蒸發至干燥。如果真空計讀數低于 500 毫托，請停止通氮氣。

4.7 后續操作

在瓶子處于真空狀態時，關閉瓶蓋閥（紅色在內）。

關閉真空閥門，并從工作站上取下瓶子。

將反應瓶放入烘箱中。使用手套或鑷子避免接觸烘箱內部。

現在可以關閉工作站的真空和氮氣系統。

4.8 去除多余的 HCl

在 20–24 小時后，從烘箱中取出瓶子冷卻。打開瓶蓋閥（綠色在內）。取下反應瓶蓋，使用特氟龍涂層鑷子小心取出樣品管。使用實驗室擦拭紙去除每根管子外部的 HCl。

將樣品管轉移到新的反應瓶中。

擰緊反應瓶蓋。

打開瓶蓋閥（綠色在內）。將反應瓶安裝到工作站上，并小心地打開真空閥門。

當真空計讀數達到約 65 毫托時，樣品已正確蒸發。

為了進一步干燥，讓系統保持在此讀數幾分鐘。

4.9 衍生化

樣品已準備好進行衍生化。可以在 0.1 M HCl 中重溶樣品，并使用 Waters AccQ?Tag 方法進行衍生化。有關更多信息，請參閱下文中描述的水解后樣品處理部分。

本指南包括

• 水解和氨基酸分析的綜合指南
• 水解的介紹
• 純化蛋白質和肽的水解
• 食品和飼料樣品的水解
• Eldex 水解/衍生化工作站操作
• CEM Discover SP 微波反應系統的氨基酸水解操作
• 使用 Waters AccQ?Tag 化學法的氨基酸衍生化
• 氨基酸的定量
• 總結

http://ydzhly.com/eldex-corporation-pump/1163/